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                    基因轉(zhuǎn)染就用它,價格實惠又好用,還可以免費試用?

                    更新時間:2020-11-06 點擊次數(shù):957

                    陽離子聚合物--聚乙烯亞胺(polyethyleminine,PEI)

                    聚乙烯亞胺是目前研究的陽離子聚合物非病毒基因載體,它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團的水溶性聚合物。PEI單體中每3個原子含1個氮,并構(gòu)成同的胺基。這些胺基的pKa值不同,使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強的結(jié)合DNA附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。

                     分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,但因為其大量正電荷的存在以及非生物降解性,可以導(dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,顯示出較大的細(xì)胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四種細(xì)胞上評價交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。

                     

                    不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同

                    枝狀的 800 kD PEI 是*報道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,枝狀的 25 kD PEI(25B)用HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時轉(zhuǎn)染,其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD、600 kD、800 kD 或線狀 22 kDPEI(22L)的高。

                    有研究報道,比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞,PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性。經(jīng)過優(yōu)化,PEI-Max 的表達(dá)量優(yōu)于 25 kD LPEI。

                    PEI 介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3(W/W),提高轉(zhuǎn)染試劑比例會提高轉(zhuǎn)染效率,但是隨之細(xì)胞毒性也會增加。另外轉(zhuǎn)染時的細(xì)胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會影響轉(zhuǎn)染效果。

                     

                    陽離子聚合物--脂質(zhì)體 

                    陽離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,因而也廣泛用于瞬時轉(zhuǎn)染,但因其化學(xué)合成不易,商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價格較高,遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,因此只適合于小量瞬時轉(zhuǎn)染

                    目前的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細(xì)胞是非常適合進行瞬時轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,很容易接收外來 DNA,在合適的轉(zhuǎn)染條件下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上, 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對較低,只有 40% ~ 60%。

                     Thermo Fisher 公司新開發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升,但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價格較貴,不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。

                    因此,目前PEI轉(zhuǎn)染試劑,價格實惠深受廣大科研伙伴的熱愛。重點是超級便宜!!!便宜到什么程度呢?偷偷告訴你:據(jù)說一次可配1L的量!1L??天啊,怎么能用的完?如此便宜實惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢

                    目前,小編給大家謀福利了,免費試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動!!

                     

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                    SEROCHEM 

                    PRIME-P100-1G

                    1g

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                    PRIME-P100-100MG

                    100mg

                    SEROCHEM 

                    Prime-AQ100-100ML

                    100ml

                    SEROCHEM 

                    Prime-AQ100-5ML

                    5ml

                     

                     

                    活動內(nèi)容:客戶可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑免費試用,單個研究組僅限申請1 瓶,數(shù)量不多,先到先得!

                    活動對象:所有終端

                    申請流程:關(guān)注公眾號,回復(fù)“PEI”,立即報名!

                     

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